11月7日，由生物谷主办的"下一代CAR与免疫细胞治疗研讨会"在上海君衡城市酒店圆满落幕。11月的上海初冬微寒，来自国内外的数百位专家学者齐聚一堂，共同关注并探讨下一代CAR与免疫细胞治疗的发展方向和未来趋势。大会采用主题报告、嘉宾答疑等形式，以CAR-T细胞治疗为核心，分别从CAR-T细胞治疗的现状及未来、技术、临床研究等层面展开了深层次的行业对话。
百年来在与肿瘤的战争中，人类一直无法取得完整的胜利，肿瘤治疗的目标是"延长病人生存期"，"提高病人生活质量"和"带瘤生存"。直到2013年，CAR-T细胞疗法把7岁白血病小姑凉Emily Whitehead从死神手里夺回来，人类似乎才看到了治愈肿瘤的一线曙光。但是，CAR-T细胞疗法本身也充满未知和挑战，如何进一步提高治疗的有效性？如何降低不良反应，如何快速、大规模制备CAR-T？如何实现在实体瘤中的应用？在会议中，与会嘉宾提出了自己的思考和探索。
CAR-T细胞治疗的现状及未来
上午，中国科学院深圳先进技术研究院首席科学家、美国宾夕法尼亚大学终身教授陈有海博士首先做了"Car-T therapy： challenges and opportunities"的演讲。他首先分享了亲身参加12年前全球第一例基因治疗和3年前Emily Whitehead的CAR-T细胞治疗的感触。接着介绍了CAR-T疗法概况和现在的机遇。"再好的外科大夫也切不掉最后一个癌细胞"，"杀死肿瘤细胞并不难，最难的是找到并杀死最后一个癌细胞。" CAR-T技术利用病毒载体将CAR稳定表达在T细胞中，经过活化扩增，进入体内后能选择性识别并杀死病变细胞，最重要的是，CAR-T能根据体内肿瘤负荷来调节自身的扩增能力，肿瘤细胞越多，CAR-T扩增越厉害。从目前的临床报道来看，CAR-T细胞晚期白血病治愈率高于70%，是划时代的革命。带来机遇的同时，CAR-T疗法也面临着更多的挑战，首先，这是一种不够"精准"的"个体化"疗法，导致B细胞再生障碍。其次，CAR-T研发的瓶颈还是：靶点靶点靶点！陈博士认为，肿瘤抗原靶点分为肿瘤特异性抗原靶点和肿瘤相关抗原靶点，基因突变的新靶点和病毒相关抗原是未来的研究方向。陈教授团队开发的CAR-T药物新靶点有CD317，DR5和TIPE3。
解放军总医院生命科学院分子免疫学研究室韩为东教授团队的罗灿博士介绍了他们团队"CAR-T治疗实体肿瘤靶向选择与临床联合方案的探索"。截止2015年10月底，301医院已经完成111例CAR-T临床治疗，包括淋巴瘤、急性淋巴细胞白血病等血液肿瘤以及肺癌、胆管癌、肾癌、胰腺癌以及肝癌等实体肿瘤。罗博士认为，下一代CAR-T的自身优化可从5个方面考虑：靶向性、传递系统、持久性、活性和安全性。实体瘤治疗的靶向抗原选择，可有肿瘤突变抗原或病毒相关抗原，组织特异性抗原、过表达的抗原等，另外，在CAR的设计中，如抗原cross-reaction、抗原表位选择、人源化抗体选择以及优化亲和力等其他方面也值得考量。
对于CAR-T的优化与设计，来自美国贝勒医学院细胞和基因治疗中心的宋晓彤博士有自己独到的见解。宋博士认为，针对T细胞衰老的问题，在CAR-T里转入PD-1抗体，比敲除PD-1基因好。最终的细胞制剂中，有辅助细胞的混合细胞群体比单一细胞群体好。
下午，上海市肿瘤研究所的李宗海研究员做了主题为"CAR-T治疗实体瘤的现状和未来"的演讲。他认为，肿瘤的异质性和可塑性是靶向药耐药的重要原因，而CAR-T技术或许是克服这些问题的途径。在实体瘤治疗临床试验中的CAR-T靶向抗原的种类在积极增加中，目前已有二十多个，但普遍存在脱靶毒性以及抗肿瘤活性不够的问题。可采用的策略有：增加诱导凋亡的开关、双靶向技术、共表达趋化因子等。CAR-T成功的关键是靶点和抗体的选择！
CAR-T治疗也必须关注肿瘤微环境对治疗的负向调节作用，主办方邀请了来自广州生物医药与健康研究院的陈小平教授介绍一种新颖的拮抗肿瘤微环境的技术--疟原虫感染。他们课题组对疟原虫感染拮抗肿瘤免疫抑制微环境的作用机制进行了研究，并在小鼠模型实验上验证了结果，对CAR-T治疗方式有一定的启发意义。
从以上嘉宾的发言中，我们可看出，下一代CAR技术的核心问题仍然是靶点的选择，同时优化CAR的结构以提高体外扩增的基因修饰T细胞自我更新，体外可控、肿瘤归巢以及侵润能力。
下一代CAR-T细胞技术热点
目前大部分临床试验中使用的载体系统都是病毒载体系统，纽约医学院的周先正教授介绍了"睡美人转座子在CAR-T的制备和治疗白血病及骨肉瘤的应用"。睡美人转座子具有简单、稳定、廉价高效等优点，能介导T细胞高水平CAR的表达，临床安全性更高。患者外周血T细胞经睡美人IGF1R和ROR1 CAR修饰后，在细胞水平和动物实验都显示出抗骨肉瘤疗效。
CAR-T技术领域另一个大热点--基因编辑技术，由博生吉医药科技（苏州）有限公司董事长杨林博士为大家做了深入浅出的介绍。针对CAR-T技术面临的三大挑战：安全性、有效性和产业化，许多公司给出的解决方案里均有基因编辑技术的身影。杨林博士认为，下一代CAR-T技术就是整合了基因编辑的技术，一流的基因编辑技术将帮助一些技术型小公司脱颖而出后来居上。Bellicum公司则在CAR上装配了"iCaspase-9安全开关"，解决细胞因子风暴的问题。Cellectis公司的第5代抗体技术，TALENS基因技术编辑的通用型异体CAR-T治疗，帮助急性淋巴细胞白血病患者Layla Richards达到分子水平的缓解。
2007年即在上海浦东新区创立基因载体技术服务公司杨光华博士，介绍了用于CAR-T免疫治疗的临床级慢病毒载体产业化制备工艺。他的公司提供了大规模制备慢病毒载体的解决方案，成本可大大降低。
另一位技术型CEO--CeletrixLLC公司的陈剑博士主要介绍了细胞高效电转技术的理论原理与免疫研究应用，其公司开发的耐压电转仪有优秀的转染效率和细胞存活率，可为细胞治疗工作提供帮助。
本次会议上CAR-T技术的热点还是集中在基因编辑技术、新载体系统开发以及载体系统的优化研究。
CAR-T临床研究情况
演讲嘉宾钱程教授的结束语"为了肿瘤患者更好的明天"，说出了全体与会者的心声。在场的无论是科研工作者还是一线医师，甚至还有患者家属，共同的目的就是造福临床患者。CAR-T技术的临床研究情况格外受到关注。钱程教授来自第三军医大学西南医院生物治疗中心，他演讲题目是"CAR-T细胞治疗癌症的新策略"。他分享了患者的预处理与细胞输注治疗心得，并进行了CAR-T制备产业化的探讨。
西比曼生物科技有限公司首席科学官姚意弘分享了CAR-T CD19，CD20，Her.1 临床研究进展。唯一一个来自临床一线的讲者是来自安徽医科大学第二附属医院血液内科翟志敏主任，她分享了CAR-T CD19治疗3例成人复发难治急性B淋巴细胞白血病的经验。演讲内容有病例选择，治疗方法，预处理方法，观察指标和治疗结果，她对CAR-T治疗安全性和疗效的探讨引起了现场科研工作深深的思考。
如何设计一个成功的CAR-T临床试验？全天压轴出场的张鸿声博士提出了自己的思考。张博士是同济大学医学院-上海市肺科医院临床转化中心的研究员，也是雅科生物的创始人。他认为设计成功CAR-T临床试验的重要步骤有：设计载体及临床前试验；建立技术SOP；病例选择；制定化疗预处理方案；输注后密切观察；严重细胞因子释放综合症处理等。
总之，CAR-T细胞疗法潜力巨大，下一代CAR将走向何方，取得何等成就，我们拭目以待。
（本文转载自生物谷）
